猪炭疽的症状和病变只有参考意义,需要实验室检查才能确诊。由于动物组织中的炭疽杆菌暴露空气后形成芽孢,故疑似炭疽的家畜尸体严禁剖检。临床诊断时,对原因不明而死亡或临床上出现痈性肿胀、腹痛、高热、病情发展急剧,死后天然孔流血的病猪,应首先怀疑为炭疽。调查该地区几年来有无炭疽的发生,炭疽死畜的处理情况,发病动物的种类及季节性,炭疽预防注射情况等,为确诊提供依据。
(一)细菌学诊断
采取病料时,对可疑炭疽病畜,生前可采取静脉血、水肿液或血便,死后采取末稍血(可切下耳或由四肢末稍采取),也可于左侧季肋部第 17-1 8 肋骨间做一垂直切口,采取一小块脾脏,切口应用碘酊棉球塞住。动物在 6h 以内死亡的,可直接镜检组织和体液。败血型可以在血液中甚至所有组织的涂片中检出炭疽杆菌,局限型可检查局部水肿部位。如动物尸体腐败,炭疽杆菌就会崩解,一般检不出典型炭疽杆菌,而许多厌氧的腐败菌与炭疽杆菌相似,只是这类菌的菌链比炭疽杆菌在组织中形成的菌链更长。
(二)动物接种
一般常用小鼠、豚鼠和家兔。将病料或培养物,川生理盐水制成 5 - 10 倍乳剂,给小白鼠腹部皮下注射 0.2mL ,豚鼠皮下注射 0.5mL ,家兔皮下注射 l.OmL ,动物通常于 12h 后注射局部水肿, 24-36h (小鼠)或 2-4d (豚鼠、家兔)死于败血症,剖检可见注射部位胶样浸润及脾脏肿大等病理变化。取血液、脏器涂片镜检,当发现有荚膜的竹节状大杆菌时,即可确诊。若接种材料中含有恶性水肿群的细菌通常会使实验动物在炭疽杆菌产生明显作用之前死亡。
( 三)鉴别诊断
炭疽杆菌与类似菌鉴别还可以用串珠试验, y 噬菌体裂解试验等。
串珠试验:将待检查的肉汤培养物或病料乳剂接种于每毫升含青霉素 0.51U 的薄琼脂平板上(琼脂厚度为 2mm ),然后用灭菌曲玻璃棒均匀涂布后,放 37 ℃恒温箱中 3 ~ 4h 后覆以盖玻片,镜检,若为炭疽杆菌则菌体膨大呈珠状,均匀排列,形成串珠状。
Y
噬菌体裂解试验: Y噬菌体是特异性的,只能裂解炭疽杆菌,故可用于炭疽杆菌和类似菌的鉴别。》方法是将待检的培养物或病料乳剂涂于普通琼脂平板上使之成圆形,待干燥后用白金耳取一滴 Y 噬菌体,滴加于琼脂面上,放 37 ℃恒温箱中培养 3 ~ 4h ,然后对光观察。如滴加噬菌体部位无细菌生长,周围由于菌的发育而呈轻微的灰白色时,即可确定为炭疽杆菌;而照常生长时为类似菌。
( 四)血清学诊断
炭疽沉漩反应( Ascoli 氏反应):当病料已经腐败用细菌学诊断得不到可靠结果,以及检查大量畜产品时,可用炭疽沉淀反应。炭疽沉淀原具有很高的耐热性和耐腐败性,死后甚至一年半以上的腐败炭疽尸体,仍可出现阳性反应。炭疽尸体以脾脏含沉淀原量为最高,其次为血液,再次为肝、肺、肾等。皮肤和肌肉的含量很低。因此,采取病料以肝、脾、肾以及血液为适宜。
将被检血液或脏器研磨后,用生理盐水稀释 510 倍,煮沸 15-20min ,取浸出液用中性石棉滤过,用毛细管吸取透明滤液,徐徐重积于小试管内的沉淀素血清上,于 1 -Smin 内如接触面出现清晰的白色沉淀环(白轮),为阳性。
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