根据流行特点、临床症状、坏死组织的病理变化，可作“初步诊断”。本病的发生与诱因有紧密亲密关系，各种病型的病理变化和临床症状可作为诊断的依据，确诊需进行实验室诊断。

实验室检修：坏死梭杆菌一般在体表坏死灶中难于分离，在死亡组织中常迅速死亡。只有在病、健组织接壤处（体表或内脏）可见有放射状排列的菌体。病料采集时，应在无菌和厌氧前提下采取，随即分离培养，或保留于厌氧容器内及时送检。

病料或培养物涂片，用石碳酸复红或碱性美蓝染色，可见着色部门被几乎或完全不着色的空泡分开，形成串珠状长丝形菌体或细小的杆菌。幼年培养物中的菌体着色平均，24h以上的培养物中的丝状体中常有空泡。

因为病料多有污染，可作动物接种，采集的病料（病、健接壤处采取）做成悬液打针兔的耳静脉内，或将小块材料埋人家兔皮下小袋内。感染的家兔逐渐消瘦，接种部位产生广泛性皮下坏死，多于1周内死亡。剖检可见内脏有坏死性溃疡。从肝脏病灶中分离培誥养和涂片镜检，最后作出诊断。也可用小鼠人工感染，病变和家兔相似。

机体各部位存在着很多共生厌氧菌。坏死梭杆菌的以下特征可作为快速鉴定的依据。此菌为革兰阴性杆菌，革兰染色菌体呈多形性。对卡那霉素等抗生素敏感，对万古霉素耐药。吲哚阳性，酯酶常为阳性。一般在胆汁中不生长。