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猪细小病毒的血清学诊断

发布日期:2013年07月10日 来源:中国养猪网
 

1.血凝抑制( HI)试验  在猪细小病毒的血清学诊断方法中,血凝抑制( HI)试验是检测猪细小病毒抗体最常用的经典方法,一般采用试管法或微量法。利用HI试验检测人工感染PPV的猪,发现感染后Sd即可检测到相应抗体,12-14d抗体滴度高达1024-4 096,并能持续多年检出抗体。该方法简单、方便,灵敏度也较高。进行HI试验时待检血清需要首先进行热灭活处理,然后再用红细胞吸附,以除去血清中的非特异性血凝素,进一步用高岭土吸附以除去或减少血清中非特异性抑制因子目前,该方法在国内外已得到广泛应用。

2.血清中和试验  血清中和试验(SN)也是检测PPV抗体的方法之一,其原理是利用被检血清的抗体中和PPV,然后根据培养细胞的病变情况来计算血清抗体的滴度。SN的特异性比HI高,但是SN的操作较为复杂,首先要进行病毒感染力的测定,而PPV在低剂量时并不引起细胞病变,从而限制了该方法的使用,、

3.乳胶凝集试验  乳胶凝集试验( IAT)是将浓缩的猪细小病毒悬液制成乳胶凝集抗原,与待检血清在玻璃平板上作用,观察是否出现肉眼叮见的特异性凝集颗粒从而进行判定的方法。此法简便、快速、准确,可用作临床上大量血清样本的初筛。

4.酶联免疫吸附试验  酶联免疫吸附试验( ELISA)是将酶与抗体偶联并使之参与到抗原抗体反应中,依据酶催化底物所发生的变色反应程度,来指示和量化抗原抗体反应水平,从而进行抗原或抗体的检测。这种方法灵敏度高、特异性好、快速、操作简便,可用于对大规模样品的检测。ELISAWestenbrinkF( 1989)建立的,并证明了ELISA方法与HI检测结果的一致。后来ShiraishiT又发明了用滤纸采取血样,用ELISA法进行猪细小病毒检测,即Dot-ELISA,使采样更方便易行。张晓根等( 1994 )建立了间接Dot-ELISA对猪细小病毒抗体的最低检出率提高到了2.5ng/点。付利芝等(2001)建立了间接斑点辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白免疫实验(间接Dot-PPA-ELISA)检测猪细小病毒抗体的方法。结果表明间接Dot-PPA-ELISA的特异性强、方法稳定。姜永厚等( 1997)建立了从胎猪脏器中检测猪细小病毒抗原的ELISA双抗体夹心法。


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